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豬場(chǎng)必看!口腔液采集3.0操作指南
一、操作方法
1. 準(zhǔn)備工作
1)工具準(zhǔn)備
a)無(wú)菌棉繩(直徑0.8-1.5cm,未化學(xué)處理)
b)無(wú)菌采樣管(含保護(hù)液,如PBS緩沖液)
c)冰袋或冷藏箱(4℃保存)
d)一次性手套、防護(hù)服、口罩
e)記號(hào)筆(標(biāo)記樣本信息)
2)豬只選擇
a)選擇健康或檢測(cè)的目標(biāo)豬只(群體篩查可隨機(jī)選5-10頭)
b)采樣前禁食2小時(shí),避免飼料殘?jiān)蓴_
2. 采集步驟
1)方法一:棉繩法(群體篩查常用)
a)將無(wú)菌棉繩一端打結(jié),懸掛于豬欄內(nèi)(高度與豬肩部齊平)
b)吸引豬只咀嚼棉繩,持續(xù)15-30分鐘(棉繩需完全濕潤(rùn))
c)戴手套取下棉繩,擠出液體至采樣管(約3-5ml),冷藏保存
2)方法二:拭子法(個(gè)體檢測(cè))
a)保定豬只(使用限位欄或助手協(xié)助)。
b)用無(wú)菌棉拭子深入豬口腔,在舌根、頰部反復(fù)刮拭10-15秒。
c)將拭子浸入保護(hù)液,折斷尾部密封保存。
3. 后續(xù)處理
1)樣本4℃保存不超過(guò)24小時(shí),長(zhǎng)期需-80℃冷凍
2)記錄豬只編號(hào)、采樣時(shí)間、臨床癥狀等信息
二、注意事項(xiàng)
1. 生物安全
1)操作者需佩戴手套、口罩,避免接觸豬唾液
2)廢棄棉繩/拭子需高溫高壓滅菌或者焚燒處理
2. 樣本質(zhì)量
1)避免棉繩被糞便污染
2)采集后立即冷藏,禁止反復(fù)凍融
3)若檢測(cè)病毒(如非洲豬瘟),需添加病毒保存液
3. 動(dòng)物福利
1)保定時(shí)間不超過(guò)3分鐘,減少應(yīng)激
2)仔豬優(yōu)先使用棉繩法,避免強(qiáng)制保定
4. 特殊場(chǎng)景
1)發(fā)病期豬群:?jiǎn)为?dú)采集,避免交叉感染
2)運(yùn)輸前:低溫保存,確保冷鏈不斷
三、常見(jiàn)問(wèn)題
1. 樣本量不足:棉繩需充分咀嚼,可延長(zhǎng)采集時(shí)間至1小時(shí)
2.檢測(cè)結(jié)果異常:排除棉繩化學(xué)殘留(建議預(yù)浸泡生理鹽水)
3.仔豬不配合:涂抹少量蜂蜜或糖水誘導(dǎo)咀嚼